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Seegene

Technology

High multiplex 검사로 여러 질병을 한 번에정확하고 신속하게 진단하세요

단일온도에서
독립적인 형광 신호를 제공하는
다중 검출 기술

STST™

Single Temperature
Single Target

STST™는 단일 온도에서 서로 독립적이며 중첩되지 않는 형광 신호를 생성하도록 설계된 차세대 PCR 시약
플랫폼입니다. 이러한 구조적 신호 분리 방식을 통해 기존 Multiplex PCR에서 필요했던 후처리 과정을 생략하고,
하나의 채널에서 최대 5개 타겟을 정확하게 정량할 수 있습니다.
간소화된 분석 워크플로우와 직관적인 신호 해석을 기반으로 STST™는 다양한 장비 환경에서도 다중 검출 성능을
극대화하는 동시에 진단의 속도와 정확성을 향상시킵니다.

STST™ 기술 특징

  1. 단일 채널 내 정량 가능한 다중 검출

    • 하나의 채널에서 최대 5개 타겟 동시 검출
    • 후처리 과정 없이 서로 독립적이며 중첩되지 않는 신호 제공

  2. 직접적이고 신뢰도 높은 신호 해석

    • “보이는 그대로가 결과”인 안정적인 신호로 각 타겟을 직접 반영
    • Ct 계산을 위한 추가 분석이나 신호 분리 (Deconvolution) 과정 불필요

  3. 확장된 효과적인 다중 검출 성능

    • 장비 하드웨어 한계를 극복한 향상된 다중 검출 성능 구현
    • 단일 채널 장비에서도 다수 타겟 정량 가능

  4. 간소화된 워크플로우를 통한 신속한 의사결정

    • 명확한 신호 패턴으로 빠른 결과 해석 및 보고 가능
    • 분석 시간 단축을 통해 임상적 의사결정 속도 향상
STST™ 기술의 원리

STST™는 각 온도별로 하나의 독립적인 신호를 생성하여, 5 Ct 검출을 기반으로 최대 25 plex 성능을 구현합니다.

A comparison chart of MuDT™ and STST™ technologies. MuDT™ shows how targets A, B, and C are detected across different temperature stages (83°C, 72°C, 60°C), with cumulative RFU signals displayed for each plotting step. STST™ demonstrates direct target detection at each temperature, showing separate amplification curves for A, B, and C without signal overlap.
STST™ 기술로 구현하는 3배 다중 검출 성능

모든 실시간 PCR 장비에서 다중화 성능을 3배로 확장하는 간단한 방법

STST™는 단일 온도에서 깨끗하고 독립적인 형광 신호를 생성하여, 기존 실시간 PCR 장비의 하드웨어 업그레이드 없이도 다중화 성능을 3배로 향상시킵니다. 간섭 없는 신호와 STST™의 구조적 장점을 통해 신호 잡음을 최소화하고 재현성을 향상시켜, 복잡한 후처리 과정 없이도 더욱 신뢰도 높고 빠른 진단 결과를 제공합니다.

Diagram showing STST™ Technology X3 Triple Up expanding 2–6 PCR channels into 6–18 channels using clean, independent fluorescence signals at a single temperature.

차세대 Real-time PCR

MuDT™

Multiple Detection
Temperatures

MuDT™ 기술은 Real-time PCR 을 기반으로, 추가적인 융해 곡선 분석법 (Melting curve analysis) 없이 하나의 채널에서 여러 가지 타겟을 동시에 검사하고 개별 Ct 값을 제공할 수 있습니다. MuDT™ 기술은 다른 검출온도에서 생성되는 구별된 형광 신호를 사용함으로써 하나의 채널에서 하나의 Ct값을 넘어 하나의 채널에서 다수의 Ct값 분석을 가능하게 하고, 그 결과 한 번의 검사에서 동시에 다중 타겟의 정성/정량 분석이 가능합니다. MuDT™는 DPO™, TOCE™ 기술과 함께, 임상적으로 유용한 High-multiplex 진단 기술을 크게 향상시킴으로써 환자 치료를 개선하고 의료 비용을 절감할 수 있습니다.

MuDT™ 기술 특징

  1. 단일 채널 내 Ct 값을 통한 다중 검출

    • 단일 채널에서 두 타겟 검출
    • 각 타겟별 Ct 값 제공

  2. 단일 반응 내 최대 10개 타겟 검출 및 정량화

    • 향상된 환자 관리를 위한 포괄적 정보

  3. 동시 감염 병원체의 각 Ct 값은 Singleplex PCR과 Multiplex PCR에서 동일

이러한 기반을 바탕으로 씨젠은 3 Ct™ 기술을 개발했습니다. 이 기술은 형광 채널당 최대 3개의 타겟까지 다중 검출 능력을 확장하여 동시 검출 및 상대 정량을 가능하게 합니다. 이 발전은 속도, 정확성 및 비용 효율성을 유지하면서 다중 검출 성능을 획기적으로 향상시킵니다.

3 Ct™ 기술

3 Ct™ 기술은 씨젠의 High multiplexing에 특화된 독자적인 기술과 전문 분석 알고리즘을 결합한 혁신적인 기술입니다.
이 기술은 하나의 형광 채널 내에서 서로 다른 세 가지 타겟을 정확하게 구별하고, 각 타겟에 대한 개별 Ct 값을 제공하여
상대 정량을 가능하게 합니다. 또한 고속 효소를 적용하여 증폭 속도를 높이고, 용융 곡선 대신 Ct 값을 분석함으로써
처리 시간을 크게 단축시킵니다.

3 Ct™ 기술은 단일 반응에서 최대 15개 타겟에 대한 개별 Ct 값을 실시간으로 검출할 수 있게 하여 multiplex PCR 분야를 발전시킵니다. 이는 정확한 syndromic testing을 지원하는 진정한 multiplex PCR 성능을 제공합니다.

3 Ct™ 기술 특징

  1. Ct 값을 활용한 극대화된 다중 검출

    • 단일 채널에서 최대 3개의 타겟 동시 검출
    • 각 타겟에 대한 상대 정량 정보 제공

  2. 짧은 검사 소요 시간

    • 단 1.5시간 만에 빠른 결과 도출
    • 추가 분석 불필요

  3. 신뢰성과 정확성을 위한 최첨단 분석 알고리즘

    • 씨젠의 19개 핵심 특허 기술 적용
    • Seegene Viewer와의 연동을 통한 분석 자동화 구현

  4. 경쟁력 있는 Syndromic testing

    • 단일 반응으로 최대 15개 타겟 개별 검출
    • 고처리량 및 비용 효율성 확보
    • 다양한 질환 진단으로 확장 가능
3 Ct™ 기술의 원리

형광 신호는 다양한 온도에서 측정되어 단일 채널 내에서 여러 Ct 값을 제공합니다. 각 온도별 신호 강도는 정밀하게 분석되며, 그 결과는 Seegene Viewer를 통해 시각적으로 확인할 수 있습니다.

Tm=83°C, Tm=83°C, Tm=83°C. Seegene Viewer. Directly use 83°C, 1st plotting 72°C–83°C, 2nd plotting 60°C–72°C–83°C. Result for A (High Tm target), Result for B (Mid Tm target), Result for C (Low Tm target).
한 튜브로 다수의 타겟 동시 검사
Seegene vs Other Companies. Seegene’s Syndromic Technology: 14 Targets + IC, 15-plex in one tube, 3 Ct™ in a channel, 19 patents applied, Syndromic assay* (*Comprehensive and simultaneous testing for all potential causative pathogens). Other Companies’ Conventional Technology: 3 Targets + IC, 3 Targets + IC, 3 Targets + IC, 3 Targets + IC, 2 Targets + IC, 4-plex in one tube, 1 Ct in a channel, TaqMan applied, Targeted assay* (*Selective testing for suspicious causative pathogen).
결과 예시 (Allplex™ HPV HR Detection)
Three RFU vs Cycle graphs for HPV66, HPV45, and HPV58. Graph 1: HPV66, Ct 19.31. Graph 2: HPV45, Ct 36.93. Graph 3: HPV58, Ct 36.76. Below graphs, a result table shows: Type - SAMPLE; Auto Interpretation - HPV66, 45, 58; FAM Channel columns - HPV66 (Ct 19.31, positive), HPV45 (Ct 36.93, positive), HPV58 (Ct 36.76, positive).

Multiplex
Real-time PCR의
새로운 패러다임

TOCE™

Tagging Oligonucleotide Cleavage and Extension

TOCE™는 모든 반응이 동일한 환경에서 진행되는 Homogeneous system에서 5개 이상의 목표 유전물질 검출을 가능하게 하는 기술입니다. TOCE™는 일반 실시간 PCR 플랫폼을 이용해 하나의 튜브에서 동시에 다수의 병원체를 정성 분석할 뿐 아니라, Cyclic Catcher Melting Temperature Analysis (cyclic-CMTA)를 기반으로 정량 분석까지 수행할 수 있습니다.

TOCE™ 기반 검사는 저렴한 비용으로 질병을 유발하는 다양한 병원체에 대한 정보를 신속하고 정확하게 제공하여, 정밀한 진단과 효과적인 치료를 가능하게 합니다. 따라서 TOCE™ 기술을 활용한 검사법은 환자 치료에 필요한 정확하고 풍부한 정보를 제공합니다.

TOCE™ 기술 특징

  1. Catcher-Tm 분석을 이용하여 단일 채널에서 동시다중 검사

  2. 자유로운 Catcher-Tm value 조절가능

  3. 병원균의 염기서열 변화에 관계없이 일정한 Catcher-Tm value

  4. Singleplex real-time PCR과 동등한 민감도

  5. Cyclic-CMTA를 이용한 동시다중 정량적 분석

  6. 한개의 튜브에서 다수의 Mutation 검출

Multiple detection in a single channel

Multiple detection in a single channel. A red line graph showing multiple distinct peak signals within one fluorescence detection channel, indicating the ability to detect multiple targets from a single reaction curve.
TOCE™ 기술의 원리

TOCE™기술의 핵심요소는 DPO™ primer와 Pitcher & Catcher 다. DPO™primer는 씨젠의 특허받은 Target specific primer 기술로 해당 유전자부위를 매우 특이적으로 증폭 시킵니다. Pitcher는 Target 유전자에 특이적으로 중합하는 부위와 Tagging portion을 포함하는 단일가닥 올리고 이며 Catcher는 형광이 붙어있는 Artificial template입니다.

Pitcher가 타겟에 결합된 후, DNA 중합효소의 5’ 뉴클리아제 활성이 타겟에 결합된 Pitcher를 특이적으로 절단하여 Tagging portion을 방출합니다.
방출된 Tagging portion은 Catcher와 중합, 이중가닥을 형성함으로써 Catcher의 연장(Extension)을 유도하고, 각 Target에 해당하는 형광 신호를 생성하게 합니다. Catcher-Tm값은 Catcher의 길이나 염기서열을 변화시켜서 조절할 수 있습니다. TOCE™반응의 적합화를 위해서 Catcher-Tm값은 Target의 염기 서열과는 관계없이 손쉽게 바꿀 수 있습니다. 기존 융해곡선 진단 기술은 약간의 유전자의 염기변이로도 융해 온도가 변화되어 정확한 검사 결과가
요구되는 임상 진단 분야에서는 사용이 제한되어 왔습니다. 하지만 TOCE™ 기술은 염기변이가 있어도 융해온도가 변화하지 않고 일정한 결과 값을 갖게 되므로 다양한 병원체의 동시진단이 가능합니다.기존 융해곡선 진단 기술은 약간의 유전자의 염기변이로도 융해 온도가 변화되어 정확한 검사 결과가 요구되는 임상 진단 분야에서는 사용이 제한되어 왔습니다. 하지만 TOCE™ 기술은 염기변이가 있어도 융해온도가 변화하지 않고 일정한 결과 값을 갖게 되므로 다양한 병원체의 동시진단이 가능합니다.

DPO™ mechanism diagram showing the Pitcher primer binding first and guiding the Catcher primer. Three catcher probes are shown with different melting temperatures: Tm=70°C with green catcher probe and quencher, Tm=65°C with blue catcher probe and quencher, and Tm=60°C with red catcher probe and quencher. Each catcher includes a reporter (R) and quencher (Q) for target-specific fluorescence detection.
Three peak curves representing catcher melting temperatures. Red peak at 60°C, blue peak at 65°C, and green peak at 70°C, labeled as Catcher Tm.
Cyclic-CMTA를 이용한 정량적 분석

Real-time PCR 과정 중에 Cyclic-CMTA point를 설정하여 감염된 병원체의 감염 유무 뿐 아니라 정량적인 분석 결과를 동시에 확인할 수 있습니다. 그림처럼 Cyclic-CMTA point는 Real-time PCR 과정 중에 30, 40, 50 cycle에 설정할 수 있으며, 결과 분석 시 표에서처럼 감염된 병원체의 양에 따른 Melting peak의 양상에 따라 정량적인 분석을 확인할 수 있습니다. 즉, 타겟의 양이 많을 경우 첫 번째 CMTA 지점 (30 cycle) 에서, 타겟의 양이 중간일 경우 두 번째 CMTA 지점 (40 cycle), 그리고 타겟의 양이 적을 경우 세 번째 CMTA 지점 (50 cycle)에서 용융 피크가 나타나고, 이를 해석함으로써 병원체의 양을 정량적으로 분석할 수 있습니다.

Amplification curve graph. X-axis shows cycles from 0 to 50 and Y-axis shows RFU from 0 to 3000. A turquoise amplification curve rises from baseline around cycle 30, increases steeply around cycle 40, and plateaus near cycle 50. Three labeled points are marked: 1 at the beginning of the rise, 2 during the steep increase, and 3 at the plateau.
Table showing cyclic-CMTA points across 1st (30 cycles), 2nd (40 cycles), and 3rd (50 cycles) at 65°C, with interpretation by titer level. High titer shows peak curves at all three cycle points and is interpreted as +++. Intermediate titer shows a peak only at the 2nd and 3rd cycles and is interpreted as ++. Low titer shows a peak only at the 3rd cycle and is interpreted as +. Not detected shows no peaks at any cycle and is interpreted as Not detected.

우수한 multiplex PCR을 위한
프라이머 기술

DPO™

Dual Priming Oligonucleotide

DPO™는 비특이적인 Priming으로 인한 연장(Extension)이 발생하지 않으므로 높은 특이성을 유지할 수 있는 프라이머 (Primer)입니다. DPO™ 기술은 다수 병원체 및 SNP 검출, Genotyping과 같은 다양한 분자진단 분야에서 유용하게 사용됩니다.

DPO™ 기술의 원리

DPO™ 프라이머는 Polydeoxyinosine [poly (I)] linker의 삽입으로 인해 두 개의 Priming 부위가 있으며, 이러한 Dual priming 을 통해 Target 유전자만 특이적으로 증폭 가능합니다.

Diagram of DPO primer structure showing a bubble-like Poly-d(I) linker between a 5′ stabilizer region and a 3′ determiner region. Step 1: The long 5′-end portion binds the target DNA to initiate stable annealing. Step 2: The short 3′-end portion selectively binds to the target site and determines target-specific extension.
연장 오류를 사전에 방지하여 탁월한 특이도 구현

DPO™ 프라이머는 비표적 Template에서는 프라이머의 연장을 차단함으로써 위양성 신호의 발생을 방지합니다. 따라서 Multiplex PCR 검사에서도 탁월한 특이도를 보여줍니다.

Two diagrams comparing non-specific binding prevention. A: The longer 5′-end portion binds a non-target site, but the short 3′-end portion prevents non-specific extension. B: The short 3′-end portion alone fails to bind at the annealing temperature, preventing extension at non-target sites.
결과 예시 (DPO™ 와 기존 프라이머의 Multiplex PCR 결과 비교)

DPO™ 프라이머는 비특이적 인 증폭을 제거하고 원하는 타겟 밴드만을 증폭시켰으나, 기존 프라이머는 비특이적 증폭을 제거하지 못했습니다.


Gel electrophoresis comparison of Conventional primers vs DPO primers. The conventional primer gel (lanes N, 1–5, P) shows multiple non-specific bands. The DPO primer gel (lanes N, 1–5, P) shows clearer and more specific bands corresponding to Flu A, Flu B, RSV B, RSV A, and OC43 targets.Gel electrophoresis comparison of Conventional primers vs DPO primers. The conventional primer gel (lanes N, 1–5, P) shows multiple non-specific bands. The DPO primer gel (lanes N, 1–5, P) shows clearer and more specific bands corresponding to Flu A, Flu B, RSV B, RSV A, and OC43 targets.
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